期刊简介
本刊紧跟医学发展趋势，对医学热点予以适时追踪，内容新颖、及时，信息量大，学术水平较高。以从事医疗、科研工作者为读者对象，以报道医学领域的重大科研成果、国家重点课题的医学进展、医疗新技术和诊疗经验为主要内容，突出科学性、先进性、创新性和实用性，促进医学领域的学术交流。
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- 杂志名称：医学研究杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中国医学科学院
- 国际刊号：1673-548X
- 国内刊号：11-5453/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
应用实时荧光定量PCR检测血清miR-122和miR-22 及其在慢性乙型肝炎患者中的表达
姜跃炜；叶瑾；朱小区
关键词：miR-122, miR-22, 慢性乙型肝炎
摘要：目的 建立血清中microRNA( miRNA)的实时荧光定量PCR( qRT-PCR)的检测方法,对慢性乙型肝炎患者血清中miR-122和miR-22的表达水平进行检测和分析,探讨其在慢性乙型肝炎患者血清中表达的意义. 方法 茎环引物用于成熟型miRNA反转录,以建立SYBR Green ⅠPCR筛选和定量检测miRNA的方法. 同时,采用10倍梯度稀释的miR-122标准品cDNA(1~109 拷贝/微升)评价其敏感度;采用熔解曲线评价其检测miRNA的特异性;通过对2 ×105、2 ×106、2 ×107 拷贝/微升的miR-122标准品cDNA分别进行批内20次重复实验,以其循环阈值( Ct)的变异系数( CV)评价其精密度. 采用建立的qRT-PCR技术检测慢性乙型肝炎患者及正常人血清中miR-122和miR-22的表达水平. 结果 建立了茎环引物的RT-PCR法检测血清中的miRNA,该方法的线性范围宽,敏感度高,重复性好,方法简便. 在慢性乙型肝炎患者组中血清miR-122和miR-22的相对表达量分别为17.88和5.35;与正常对照组中血清miR-122和miR-22的相对表达量(分别为1.80和1.67)比较,差异有统计学意义( P均=0.000). 结论 建立了茎环引物RT-PCR实时荧光定量PCR方法检测血清中的miR-122和miR-22,血清miR-122和miR-22在慢性乙型肝炎患者的血清中表达显著升高.
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