期刊简介
本刊紧跟医学发展趋势，对医学热点予以适时追踪，内容新颖、及时，信息量大，学术水平较高。以从事医疗、科研工作者为读者对象，以报道医学领域的重大科研成果、国家重点课题的医学进展、医疗新技术和诊疗经验为主要内容，突出科学性、先进性、创新性和实用性，促进医学领域的学术交流。
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- 杂志名称：医学研究杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中国医学科学院
- 国际刊号：1673-548X
- 国内刊号：11-5453/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
一种大鼠主动脉内皮细胞分离培养的改良方法
季政；郭航远；池菊芳；刘龙斌；彭放
关键词：大鼠, 主动脉, 内皮细胞, 原代培养
摘要：目的 探索一套原代培养大鼠主动脉内皮细胞( RAEC)简单实用的方法体系.方法 SD大鼠两只,无菌环境下分离胸腹主动脉,清除脂肪、结缔组织.显微剪剪开主动脉,内膜面向下贴附于少量Ⅰ型胶原酶上消化60min.离心收集内皮细胞置于1％明胶包被的六孔板,加入20％胎牛血清的M199中培养.3～4天后换液更换内皮细胞培养基(ECM)培养.当细胞长满约90％底面积时,玻璃探针机械剔除成纤维样细胞后传代.倒置显微镜和抗Ⅷ因子抗体对细胞分别做形态学和免疫细胞化学鉴定.结果 原代培养3～4天时,少量细胞开始贴壁并分裂生长.更换ECM后细胞增殖迅速,培养8～10天时可见细胞长满90％左右的底面积,呈典型的“铺路石”或“鹅卵石”征.免疫细胞化学鉴定表明在分离培养的内皮细胞中有特定Ⅷ因子表达.原代周期8～10天,传代周期3～4天,经纯化传代后纯度接近100％.传至第6代仍未见细胞分裂增殖活性下降.结论 本实验体系培养RAEC简单有效,重复性良好.获得细胞数量多、纯度高,有利于实验人员掌握.
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